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俄罗斯专享会294—柱式DNA提取产品精华

发布时间:2025-01-19   信息来源:窦瑞雄

**FastPure® Cell/Tissue DNA Isolation MiniKit**是一款高效的细胞与组织基因组DNA提取试剂盒(型号:DC102),能够在组织消化完全后于1小时内获得超高纯度的基因组DNA。该产品适应性广,适用于多种动物组织、培养的细胞、唾液、牛奶等液体样本,提取的DNA纯度高,能够直接用于PCR、文库构建等分子实验,确保实验结果的可靠性。

俄罗斯专享会294—柱式DNA提取产品精华

本试剂盒的安全性显著,操作中无需添加酚、CHCL3等有机溶剂。保存条件方面,除Proteinase K和RNase Solution外的其他组分可在15°C~25°C间保存,而Proteinase K干粉和RNase Solution可于室温运输,收到后建议存放于-20°C,溶解后的Proteinase K溶液应分装并在-20°C环境中保存。

**产品概述**:该试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有机溶剂,仅需30-60分钟即可得到高纯度、高产量的基因组DNA,后续可直接用于酶切反应、PCR、qPCR、文库构建及Southern杂交等实验。

**性能展示**:在使用小鼠肝脏、尾尖、肺、肌肉、脾脏、肾脏、心脏和脑进行基因组DNA提取时,通过琼脂糖凝胶电泳进行检测,以确保提取效果。

**操作流程概述**:适用范围:1-20mg动物组织/≤5×106培养细胞/液体样本。所需材料包括15ml灭菌离心管、无水乙醇和水浴锅。请注意,Washing Buffer A和Washing Buffer B在使用前需添加无水乙醇。

**样本制备**:对于动物组织,剪碎或研磨1-20mg的组织(如肝脏、脾脏及肾脏样品小于10mg),加入230μl Buffer GA和20μl PK工作液,涡旋混匀,以避免样本过量影响DNA纯度和产量。对于低含量DNA的组织(如肌肉和皮肤),建议取样量可增至20-50mg。

在65°C水浴下,确保持样品完全酶解,多次颠倒混匀以帮助酶解。消化时间与样品类型及均匀程度有关,通常组织样品需要0.5-3小时,而鼠尾则需6-8小时或过夜。如果消化液混浊,可在12,000xg下离心3分钟,转移上清液至新的15ml离心管中。

若后续实验对RNA残留影响较大,可加入10μl RNase Solution至消化液中,室温或37°C放置15-60分钟。RNA消化时间可根据肝脏和肾脏样品适当延长至60分钟。

随后加入250μl Buffer GB至消化液中,最高速涡旋混匀20秒,并于70°C水浴下反应10分钟。对于培养细胞,1400xg离心5分钟收集细胞并弃去上清,重悬后进行后续处理。对于液体样品(如唾液、牛奶),也可按上述方式进行相应处理。

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