胞嘧啶碱基编辑器（cytosine base editor, CBE）是由四个关键成分构成的：dCas9蛋白、sgRNA、胞嘧啶脱氨酶（cytidine deaminase）和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制剂（uracil DNA glycosylase inhibitor, UGI）。这些成分在细胞内组合成融合蛋白，随后在sgRNA的指导下与基因组DNA结合，使得靶序列暴露为单链结构。接着，胞嘧啶脱氨酶将单链上的胞嘧啶（C）转变为尿嘧啶（U），通过DNA的复制或修复途径，U最终被转化为胸腺嘧啶（T），实现C-G碱基对向T-A碱基对的直接转化。

在CBE过程中，研究人员利用产生的中间产物脱氧尿嘧啶（dU），开发了一种名为Detect-seq的CBE体外脱靶检测技术。这项技术首先需要提取经过碱基编辑的细胞基因组DNA，将CBE过程生成的dU进行生物素（biotin）标记，以便富集特定片段。同时，在dU位点下游，将正常的胞嘧啶C替换为5-醛基胞嘧啶（d5fC），随即将d5fC化学标记为T。通过这种方法，测序时会出现多个串联的C-to-T突变，使得研究人员能够快速定位碱基编辑的具体位点。

与GUIDE-seq、Digenome-seq和Cas-OFFinder等技术相比，Detect-seq具备更高的灵敏度和特异性，同时检测过程中没有偏好性。这意味着，Detect-seq不仅能够检测Cas9依赖型和非依赖型的脱靶，还可以识别sgRNA结合区域外的编辑（out-of-protospacer edits）及靶向链编辑（target-stranded edits）导致的脱靶现象。

在过去两年里，俄罗斯专享会294建立了一站式基因编辑安全性评估平台，涵盖了靶点设计、靶点筛选、GUIDE-seq脱靶检测（细胞基础检测）、AID-seq脱靶检测（生化检测）、Detect-seq脱靶检测、脱靶验证、PEM-seq染色体重排检测、载体插入位点检测（升级版LM-PCR及液相杂交捕获测序）、克隆扩增分析、转录组脱靶检测、全基因组测序（WGS）脱靶检测等多种技术管线。此外，俄罗斯专享会294还拥有SGS认证、ISO9001质量体系认证及生物安全二级实验室的资质认证，能够为客户提供持久、稳定的优质、高效、安全的服务及产品。