猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）使用说明书

产品名称
通用名：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)

包装规格
本产品有多种包装规格，分别为96T×1/盒、96T×2/盒及96T×5/盒。

预期用途
猪瘟是一种由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的高度传染性的致死性疾病，其特征包括高热、出血、坏死等症状。本检测试剂盒用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体，能够有效评估猪瘟病毒疫苗的免疫效果。

原理
本试剂盒由预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，依据酶联免疫法（ELISA）原理，用于检测猪血清和血浆样本中的抗体。实验过程中，样品与酶标板上的抗原结合后，通过一系列步骤生成与抗体浓度成比例的色彩反应，最终通过酶标仪的测定获得样品中病毒抗体的存在情况。

试剂盒组成及储存
试剂盒应在2～8℃条件下保存，有效期为12个月。开封后的包被板需避光保存，并保持在2～8℃，避免潮湿，建议在2个月内使用完毕。

适用仪器
本试剂盒适用于具有450nm和630nm波长的酶标仪，以及37℃恒温设备和可调微量移液器。

样品准备
1. 使用传统方法从动物全血中提取血清，确保血清清亮，无溶血及污染，样品在1周内可在2～8℃保存，长期储存应在-20℃。
2. 根据比例将待检血清用样品稀释液稀释至40倍，阴阳性对照不需稀释。
3. 在使用浓缩洗涤液前需恢复至室温并用蒸馏水或去离子水稀释为工作洗涤液（20倍）。

检验方法
1. 使用前将试剂盒放置于室温30分钟。
2. 分别设定阴性和阳性对照，并快速密封未使用的板条。
3. 在对应孔中加入100μl的对照和样品溶液。
4. 按照标准操作程序完成洗涤、反应及测定步骤，以获得每个孔的OD值。

参考值
正常情况下，阴性对照的平均OD值应≤0.3，阳性对照的平均OD值应≥0.6。

检验结果的判定
样品的OD值（ODS）可以用来计算SP值，并根据SP值≥0.2判定结果为阳性，反之为阴性。若结果为阴性，建议按照相关疫苗接种方案进行免疫。

方法的局限性
此试验主要用于定性检测猪血清和血浆中的病毒抗体，可粗略评估抗体水平强度。

注意事项
实验操作时需佩戴手套和工作服，并严格遵循消毒和隔离流程。终止液具有腐蚀性，如触及皮肤需立即用水冲洗。所有废弃物需按传染物处理。酶标板和浓缩洗涤液需遵循正确的保存和使用程序，以确保实验结果的准确性。

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