2019年11月,加利福尼亚大学旧金山分校的研究团队在《Nature Medicine》杂志上发布了一项研究,该研究探讨了肠道病毒感染与儿童急性无力脊髓炎(AFM)之间的关系。研究通过PhIP-seq技术和病毒组抗原库,对42名确诊AFM的儿童及58名患其他神经系统疾病的对照组儿童的脑脊液样本进行了检测,筛选出与AFM病因相关的病毒特异性抗体。研究结果表明,肠道病毒抗体在AFM患者中显著富集,并通过ELISA验证了这一发现。这项研究提示肠道病毒感染可能是大多数AFM病例的潜在病因,为未来肠道病毒相关AFM的临床诊断提供了重要的参考。
在过去的几年中,急性无力脊髓炎(AFM)在美国首次被确诊,并已经影响了超过500名儿童。该疾病在周期性爆发期间,常与肠道病毒EV-D68型和EV-A71型的流行有关。然而,由于在少于50%的患者样本中能够检测到肠道病毒,这使得研究者对AFM的具体病因产生了一定的疑虑,他们担心可能存在尚未识别的病原体或免疫反应所引起的副感染。为了深入研究AFM的发病机制,研究人员利用PhIP-seq技术对患者及对照样本的脑脊液进行病毒抗体谱的解析。这种高通量技术可以同时检测数百种病毒的特异性抗体,并通过ELISA技术验证了这些结果。
主要研究结果
结果一:PhIP-seq技术对AFM组儿童的病毒抗体反应进行了全面分析,结果显示小RNA病毒(Picornaviridae科)中的肠病毒(Enterovirus)属的抗体反应显著高于对照组样本。
结果二:数据分析显示,产生免疫应答的抗原肽段来源于整个肠道病毒基因组的蛋白质。序列分析结果表明,PhIP-seq技术不仅能够识别已报道的线性表位序列,还能发现新的线性结合表位。
结果三:通过使用EV病毒VP1蛋白进行ELISA验证,结果表明在AFM儿童组的脑脊液样本中大多数可以检测到EV信号,与对照组相比有显著差异,这与PhIP-seq的检测结果高度一致。
研究结论
噬菌体免疫沉淀测序(PhIP-seq)作为一种高通量抗体谱检测技术,结合了噬菌体展示多肽库、抗体免疫沉淀和高通量测序,为大规模抗原检测提供了强有力的支持。这一技术能够全面绘制血清抗体谱,为生物医学领域的研究提供了重要的工具,如疾病生物标志物筛选、病因学研究以及疫苗疗效评估。
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