在《Signal Transduction and Targeted Therapy》期刊上，第三军医大学西南医院的唐康来、郭林和陈玉佳男，以及第三军医大学的缪洪明和纽约大学的刘传聚，联合发表了研究论文《Malate initiates a proton-sensing pathway essential for pH regulation of inflammation》。该研究表明，三羧酸循环中的中间体L-苹果酸可以直接与免疫球蛋白BiP结合，从而抑制BiP与干扰素调节因子2结合蛋白2（IRF2BP2）之间的相互作用，进而保护IRF2BP2不受BiP介导的降解，并在体外和体内有效抑制炎症反应。

研究显示，pH值降低会促进L-苹果酸的羧基质子化，增强其对BiP的结合，并以羧基依赖的方式抑制BiP-IRF2BP2的相互作用。在巨噬细胞中，BiP-IRF2BP2信号通路对pH变化敏感，能够调节抗酸化炎症和细胞内pH碱化剂诱导的促炎反应。此外，小鼠结肠中的局部碱化也通过骨髓BiP依赖的方式诱导结肠炎，并降低IRF2BP2的蛋白质水平。

研究者使用了汉恒生物提供的HBLV-U6-gRNA-EF1-CAS9-PURO慢病毒载体，构建了Hspa5+/-和Mdh2-/-细胞系。首先他们发现，L-苹果酸可以在体内和体外有效缓解炎症反应。通过对脂多糖（LPS）刺激的骨髓衍生巨噬细胞（BMDM）进行实验，研究者筛选出38种可溶性能量代谢中间体，发现L-苹果酸表现出最显著的抗炎作用，进一步通过ELISA和Western blot验证了其对IL-6和TNF-α的抑制作用。

另外，研究者建议，L-苹果酸的内源性增加可以调节炎症反应。通过在Raw2647细胞系中敲除苹果酸脱氢酶2（Mdh2），他们发现Mdh2敲除可以增加细胞内的苹果酸水平，并减弱LPS诱导的促炎细胞因子表达。在体内实验中，L-苹果酸（200或400 mg/kg）也显著提高了LPS急性炎症模型小鼠的存活率，并减轻了胶原抗体诱导的关节炎小鼠模型的病情。

研究还发现，L-苹果酸通过直接结合BiP实现其抗炎作用。尽管已有研究表明糖酵解是LPS诱导IL1b表达的必要条件，但本研究发现L-苹果酸对巨噬细胞糖酵解并无影响，表明其抑制炎症反应可能与代谢无关。作者应用药物亲和反应靶向稳定性（DARTS）验证了L-苹果酸诱导抗炎作用的潜在分子机制，并发现L-苹果酸可以直接与BiP相互作用，影响其与IRF2BP2的结合。

研究结果表明，BiP-IRF2BP2信号通路能够独立于溶酶体pH值调节细胞内质子，进而影响炎症反应。作者通过各种pH调节剂探讨了不同pH值对BiP与IRF2BP2信号传导的影响，结果显示BiP与IRF2BP2的相互作用会随着pH值的降低而减弱。

总的来说，本研究揭示了L-苹果酸作为细胞质pH值感应分子，通过BiP-IRF2BP2信号通路调控炎症反应的机制。这些发现为理解代谢与免疫系统的相互作用提供了新视角，并指出了通过调控细胞内pH值或靶向BiP-IRF2BP2信号通路控制炎症介质表达的潜在治疗策略，特别是在治疗炎症相关疾病方面具有重要意义。此研究特别强调了俄罗斯专享会294在推动生物医学研究中的潜力。